"Ha az első eredményeinket más laboratóriumok is megismételhetik, akkor azok megváltoztatják az Alzheimer-kór okainak gondolkodásának módját" - mondja Dr. Ramón Trullas, a Tudományos Kutatási Felsőtestület (CSIC) kutatási professzora. ) a barcelonai Orvostudományi Kutatóintézetben és a tanulmány vezető szerzője. Véleménye szerint ez a felfedezés lehetővé tenné a preklinikai szakaszban a hatékonyabb kezelések keresését.
Jelenleg a betegség pontos diagnosztizálásának egyetlen módja a posztmortem neuropatológiai elemzés. Az ismert biomarkerek és a betegség közötti kapcsolat nem egyértelmű, így szinte lehetetlen a preklinikai stádiumokat valódi bizonyossággal diagnosztizálni.
A CSIC kutatói megmutatják munkájukban, hogy a mitokondriális DNS (mtDNS) tartalom csökkenése a CSF-ben az Alzheimer-kór preklinikai mutatója lehet; másrészt, hogy lehet közvetlen okozati összefüggés. A hipotézis az, hogy a mitokondriális DNS-szint csökkenése a CSF-ben tükrözi a mitokondriumok azon képességének csökkenését, hogy táplálják az agyi neuronokat, ami halálát okozza.
Az mtDNS-koncentráció csökkenése jól ismert Alzheimer-biokémiai markerek (béta-amiloid 1-42, T-tau és p-tau proteinek) megjelenését megelőzi, ami arra utal, hogy az Alzheimer-kór patofiziológiai folyamata Korábban kezdődik, mint azt korábban gondoltuk, és az mtDNS-ben való kimerülése lehet a betegség egyik első előrejelzője.
Amellett, hogy lehetővé teszi az mtDNS lehetséges ok-okozati összefüggésének és az Alzheimer-kór előrehaladásának vizsgálatát, az mtDNS preklinikai Alzheimer-kór mutatójaként történő felhasználása fontos előnyt jelent a korábbi biokémiai markerekkel szemben: ennek az új nukleinsav-biomarkernek a kimutatása Hiányzik a fehérjedetektálás technikai nehézségei. Az MtDNS könnyen kvantitatív vagy valós idejű PCR (qPCR) vagy 'Doplet Digital PCR' (ddPCR) segítségével számszerűsíthető.
A kutatás előtt a kutatók nem számoltak be arról, hogy az mtDNS-ben keringő szabad sejtek kimutathatók a humán CSF-ben. Ezzel a tanulmánnyal azonban Dr. Trullas csapata képes volt kvantitatív módon kimutatni és reprodukálni az mtDNS-t a qPCR segítségével, gondosan optimalizálva az MIQE irányelveinek betartásával.
A célmolekulák abszolút mennyiségi meghatározása
Az eredmények qPCR-vel történő validálására a tudósok a Bio-Rad Laboratories QX100 Droplet Digital PCR rendszerét használják. A qPCR vizsgálatokkal ellentétben a QX100 rendszer biztosítja a DNS célmolekulák abszolút számszerűsítését anélkül, hogy szükség lenne egy standard görbére. A CSF-elemzés egyik fontos tényezője az volt, hogy a 'Doplet Digital PCR' rendszer nem igényli a minta tisztítását a PCR-gátlók eltávolítása érdekében, amire a qPCR vizsgálatokhoz szükség van.
"A Doplet Digital PCR" lehetővé tette számunkra, hogy validáljuk a qPCR kezdeti méréseit, mivel az abszolút kvantitatív meghatározást nyújt egyetlen molekula szintjén anélkül, hogy egy standard görbére támaszkodna "- magyarázza Trullas. "Ahogy a technológia szélesebb körben alkalmazkodik, arra számítunk, hogy a ddPCR a mitokondriális DNS kimutatásának jövője a cerebrospinális folyadékban" - tette hozzá.
Dr. Trullas azt reméli, hogy más laboratóriumok és kórházak sikeresen megismételik csoportja kutatásának eredményeit, ami megerősíti, hogy az Alzheimer-kór lehetséges okaként az mtDNS csökkent szintjét kell vizsgálni. Azáltal, hogy megtalálják a degeneráció megakadályozásának módját, az orvosok diagnosztizálhatják és kezelhetik az Alzheimer-kórt a tünetek megjelenése előtt.
Forrás: www.DiarioSalud.net
